Koja je najbolja metoda?
—Testovi za dijagnostiku infekcije SARS-CoV-2
Za potvrđene slučajeve COVID-19, prijavljeni uobičajeni klinički simptomi uključuju vrućicu, kašalj, mijalgiju ili umor.Ipak, ovi simptomi nisu jedinstvena obilježja COVID-19 jer su ti simptomi slični simptomima drugih bolesti zaraženih virusom poput gripe.Trenutno su PCR u stvarnom vremenu virusne nukleinske kiseline (rt-PCR), CT snimanje i neki hematološki parametri primarni alati za kliničku dijagnozu infekcije.Kineski CDC razvio je i koristio mnoge laboratorijske testne komplete za testiranje uzoraka pacijenata na COVID-191, američki CDC2i druge privatne tvrtke.Test na IgG/IgM antitijela, serološka metoda ispitivanja, također je dodan kao dijagnostički kriterij u kinesku ažuriranu verziju smjernica za dijagnozu i liječenje nove bolesti koronavirusa (COVID-19), koja je objavljena 3. ožujka.1.rt-PCR test virusne nukleinske kiseline i dalje je trenutna standardna dijagnostička metoda za dijagnozu COVID-19.
StrongStep®Novi Coronavlrus (SARS-COV-2) Multipleksni PCR komplet u stvarnom vremenu (detekcija za tri gena)
Ipak, ovi kompleti za PCR test u stvarnom vremenu, koji traže genetski materijal virusa, na primjer u nazalnim, oralnim ili analnim brisevima, pate od brojnih ograničenja:
1) Ovi testovi imaju dugo vrijeme i komplicirani su u radu;općenito im je potrebno u prosjeku 2 do 3 sata za postizanje rezultata.
2) PCR testovi zahtijevaju certificirane laboratorije, skupu opremu i obučene tehničare za rad.
3) Postoji određeni broj lažno negativnih rezultata za rt-PCR COVID-19.To može biti posljedica niskog opterećenja virusom SARS-CoV-2 u uzorku brisa gornjih dišnih puteva (Novi koronavirus uglavnom inficira donji respiratorni trakt, kao što su plućne alveole) i test ne može identificirati ljude koji su prošli infekciju, oporavili se i očistili virus iz svojih tijela.
Istraživanje Lirong Zoua i sur4otkrili su da je veće virusno opterećenje otkriveno ubrzo nakon pojave simptoma, s većim virusnim opterećenjem otkrivenim u nosu nego u grlu, a uzorak izlučivanja virusne nukleinske kiseline kod pacijenata zaraženih SARS-CoV-2 nalikuje onom kod pacijenata s gripom4i izgleda drugačije od onog kod pacijenata zaraženih SARS-CoV-2.
Yang Pan i sur5ispitali su serijske uzorke (brisevi grla, ispljuvak, urin i stolica) od dva pacijenta u Pekingu i otkrili da je virusno opterećenje u brisu grla i uzorcima sputuma dostiglo vrhunac oko 5-6 dana nakon pojave simptoma, uzorci sputuma općenito su pokazali veće virusno opterećenje od uzorci brisa grla.U uzorcima mokraće ili stolice kod ova dva pacijenta nije otkrivena virusna RNA.
PCR test daje pozitivan rezultat samo kada je virus još uvijek prisutan.Testovi ne mogu identificirati ljude koji su prošli kroz infekciju, oporavili se i očistili od virusa iz svojih tijela.Zapravo, samo je oko 30% -50% bilo pozitivno na PCR u pacijenata s klinički dijagnosticiranom novom koronavirusnom pneumonijom.Mnogim pacijentima s novom koronavirusnom upalom pluća ne može se dijagnosticirati zbog negativnog testa na nukleinsku kiselinu, pa ne mogu na vrijeme dobiti odgovarajući tretman.Od prvog do šestog izdanja smjernica, oslanjajući se isključivo na dijagnozu rezultata testa nukleinske kiseline, što je izazvalo velike probleme kliničarima. Najraniji "zviždač", dr. Li Wenliang, oftalmolog u Wuhan Centralu Bolnica, mrtav.Za života je imao tri testa nukleinske kiseline u slučaju povišene temperature i kašlja, a zadnji put je dobio PCR pozitivne rezultate.
Nakon rasprave stručnjaka, odlučeno je povećati metode ispitivanja seruma kao novi dijagnostički kriterij.Dok testovi na antitijela, koji se nazivaju i serološki testovi, mogu potvrditi je li netko zaražen čak i nakon što je njegov imunološki sustav očistio virus koji uzrokuje COVID-19.
Brzi test StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM antitijela
Test na IgG/IgM antitijela pomoći će da se na mnogo populacijski način uđe u trag tko je imao infekciju, jer se čini da se mnogi slučajevi šire od asimptomatskih pacijenata koji se ne mogu lako identificirati.Par u Singapuru, muž je bio pozitivan na PCR testu, PCR test njegove supruge bio je negativan, ali rezultati testa na antitijela pokazali su da ona ima antitijela, kao i njezin suprug.
Serološke testove potrebno je pažljivo potvrditi kako bi bili sigurni da pouzdano reagiraju, ali samo na antitijela protiv novog virusa.Jedna od zabrinutosti bila je da bi sličnost između virusa koji uzrokuju teški akutni respiratorni sindrom i COVID-19 mogla dovesti do unakrsne reaktivnosti.IgG-IgM koji je razvio Xue Feng wang6smatralo se da se može koristiti kao test na mjestu njege (POCT), jer se može izvesti u blizini kreveta krvlju iz prstiju.Komplet ima osjetljivost od 88,66% i specifičnost od 90,63%.Međutim, i dalje je bilo lažno pozitivnih i lažno negativnih rezultata.
U kineskoj ažuriranoj verziji smjernica za dijagnozu i liječenje nove bolesti koronavirusa (COVID-19)1, potvrđeni slučajevi definiraju se kao sumnjivi slučajevi koji ispunjavaju bilo koji od sljedećih kriterija:
(1) Uzorci dišnog trakta, uzorci krvi ili stolice pozitivni na SARS-CoV-2 nukleinsku kiselinu pomoću rt-PCR-a;
(2) Genetsko sekvencioniranje virusa iz uzoraka respiratornog trakta, krvi ili stolice vrlo je homologno s poznatim SARS-CoV-2;
(3) IgM antitijela i IgG antitijela za novi koronavirus su bili pozitivni;
(4) Serumsko novo IgG protutijelo specifično za koronavirus promijenjeno iz negativnog u pozitivno ili IgG protutijelo specifično za koronavirus tijekom razdoblja oporavka je 4 puta veće od onog tijekom akutnog razdoblja.
Dijagnoza i liječenje COVID-19
| Smjernice | Objavljeno | Potvrđeni dijagnostički kriteriji |
| Verzija 7 | 3. ožujka 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Verzija 6 | 18. veljače 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Referenca
1. Smjernice za dijagnozu i liječenje nove koronavirusne pneumonije (probna verzija 7, Nacionalna zdravstvena komisija Narodne Republike Kine, izdana 3. ožujka 2020.)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Istraživanja koriste samo RT-PCR protokol u stvarnom vremenu za identifikaciju 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapur tvrdi da je prvi put koristio test na antitijela za praćenje infekcija koronavirusom
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. Virusno opterećenje SARS-CoV-2 u uzorcima gornjih dišnih puteva zaraženih pacijenata 19. veljače 2020. DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Virusne količine SARS-CoV-2 u kliničkim uzorcima Lancet Infect Dis 2020. Objavljeno online 24. veljače 2020. (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Razvoj i klinička primjena brzog IgM-IgG kombiniranog testa antitijela za SARS-CoV-2
Dijagnoza infekcije XueFeng Wang ORCID ID: 0000-0001-8854-275X
Vrijeme objave: 17.03.2020
