Jedan svijet jedna borba
─ Unajmljiva suradnja za izgradnju globalne zajednice zajedničke sudbine koja je reagirala na Covid-19 pandemijski izazov
Roman koronavirus koji se probija širom svijeta rezultirao je tekućom globalnom krizom pandemijske krize Coid-19. Roman koronavirus nema granice, nijedna zemlja neće biti pošteđena iz ove bitke protiv Coid-19. Kao odgovor na ovu svjetsku pandemiju Covid-19, Limaning Bio-Products Corp daje doprinose za podršku dobrobiti naših globalnih zajednica.
Naš se svijet trenutno suočava s neviđenim utjecajem nove koronavirusne bolesti 2019 (Coid-19) pandemike. Do danas, za liječenje ove bolesti ne postoji učinkovit lijek. Međutim, razvijeni su mnogi dijagnostički testovi za otkrivanje Coid-19. Ovi se testovi temelje na molekularnim ili serološkim metodama za otkrivanje novih biomarkera specifičnih za nukleinsku kiselinu ili antitijela. Budući da je Coid-19 dostigao status pandemije, rana dijagnoza nove infekcije koronavirusom kritična je u procjeni širenja virusa i koji ga sadrže, ali savršeni test za univerzalnu upotrebu još ne postoji. Moramo znati koji bi se testovi mogli koristiti za probir, dijagnozu i praćenje infekcije Coid-19 i koja su njihova ograničenja. Vrlo je važno kako bolje iskoristiti ove znanstvene alate i pomoći u prepoznavanju i kontroliranju pojave ovog brzog širenja i ozbiljnih bolesti.
Svrha otkrivanja novog koronavirusa je utvrditi je li pojedinac koji ima infekciju Covid-19 ili asimptotski nosač koji može tiho širiti virus, kako bi pružio osnovne informacije za usmjeravanje odlučivanja za kliničko liječenje. Prethodne studije pokazale su da 70% kliničkih odluka ovisi o rezultatima ispitivanja. Kada se koriste različite metode otkrivanja, zahtjevi setova za otkrivanje reagensa također su različiti.
Slika 1
Slika1:Dijagram koji prikazuje ključne faze opće razine biomarkera tijekom tipičnog vremenskog tijeka infekcije Coid-19. Os X ukazuje na broj dana infekcije, a osi y ukazuje na virusno opterećenje, koncentraciju antigena i koncentraciju antitijela u različitim razdobljima. Antitijelo se odnosi na IgM i IgG antitijela. I RT-PCR i detekcija antigena koriste se za otkrivanje prisutnosti ili odsutnosti novog koronavirusa, što je izravan dokaz za rano otkrivanje pacijenata. U roku od tjedan dana od virusne infekcije, poželjna je otkrivanje PCR -a ili otkrivanje antigena. Nakon nove infekcije koronavirusom oko 7 dana, IgM antitijelo protiv novog koronavirusa postupno se povećavalo u krvi pacijenta, ali trajanje postojanja je kratko, a njegova koncentracija brzo se smanjuje. Suprotno tome, IgG antitijelo protiv virusa pojavljuje se kasnije, obično oko 14 dana nakon infekcije virusom. Koncentracija IgG postupno se povećava i dugo traje u krvi. Dakle, ako se IGM otkrije u pacijentovoj krvi, to znači da je virus nedavno zaražen, što je rani marker infekcije. Kada se u krvi pacijenta otkriva antitijelo IgG, to znači da je virusna infekcija već neko vrijeme. Također se naziva kasna infekcija ili prethodna infekcija. Često se vidi u bolesnika koji su u fazi oporavka.
Biomarkeri romana koronavirusa
Novi koronavirus je virus RNA, koji se sastoji od proteina i nukleinskih kiselina. Virus upada u tijelo domaćina (čovjeka), ulazi u stanice kroz mjesto vezanja odgovarajućeg receptora ACE2, i replicira u stanicama domaćina, uzrokujući da ljudski imunološki sustav reagira na strane osvajače i proizvodi specifična antitijela. Stoga se nukleinske kiseline i antigeni i specifična antitijela protiv novog koronavirusa teoretski mogu koristiti kao specifični biomarkeri za otkrivanje novog koronavirusa. Za otkrivanje nukleinske kiseline, RT-PCR tehnologija se najčešće koristi, dok se serološke metode obično koriste za otkrivanje novih antitijela specifičnih za koronavirus. Trenutno su dostupne različite metode ispitivanja koje možemo odabrati za testiranje infekcije Coid-19 [1].
Osnovni principi glavnih testnih metoda novog koronavirusa
Do sada su dostupni mnogi dijagnostički testovi za Covid_19, s tim da je više ispitnih setova koji su dobili odobrenje u okviru autorizacije hitne upotrebe svaki dan. Iako se novi testni razvoj s toliko različitih imena i formata, svi trenutni Coid_19 testovi u osnovi se oslanjaju na dvije glavne tehnologije: otkrivanje nukleinske kiseline za virusnu RNA i serološka imuno-ispitivanja koja otkrivaju virusno specifična antitijela (IGM i IGG).
01. Otkrivanje nukleinske kiseline
Lanarska reakcija reverzne transkripcije-polimeraze (RT-PCR), izotermalno pojačanje posredovano petljom (LAMP) i sekvenciranje sljedeće generacije (NGS) uobičajene su metode nukleinske kiseline za otkrivanje nove koronavirusne RNA. RT-PCR je prva vrsta testa za Coid-19, koju preporučuju i Svjetska zdravstvena organizacija (WHO) i američki Centar za kontrolu i prevenciju bolesti (CDC).
02.Serološko otkrivanje antitijela
Antitijelo je zaštitni protein proizveden u ljudskom tijelu kao odgovor na infekciju virusom. IgM je rana vrsta antitijela, dok je IgG kasnije antitijelo. Uzorak seruma ili plazme obično se ispituje na prisutnost specifičnih IgM i IgG vrsta antitijela za procjenu akutne i konvalecentne faze infekcije Covid-19. Ove metode detekcije temeljene na antitijelima uključuju test imunokromatografije koloidne zlatne imunokromatografije, imunokromatografiju lateksa ili fluorescentne mikrosfere, test imunosorbensa povezanog s enzimom (ELISA) i ispitivanje hemiluminescencije.
03. Viralno otkrivanje antigena
Antigen je struktura na virusu koji prepoznaje ljudsko tijelo koji pokreće sustav imunološke obrane da proizvede antitijela kako bi se virus očistio iz krvi i tkiva. Virusni antigen prisutan na virusu može se ciljati i otkriti pomoću imunoloških ispitivanja. Kao i virusna RNA, virusni antigeni također su prisutni u respiratornom traktu zaraženih pojedinaca i mogu se koristiti za dijagnosticiranje akutne faze infekcije Coid-19. Stoga se često preporučuje prikupljanje gornjih dišnih uzoraka kao što su slina, nazofaringealni i orofaringealni bris, duboki ispljunak kašlja, bronhoalveolarna tekućina za ispiranje (BALF) za početno ispitivanje antigena.
Odabir metoda ispitivanja novog koronavirusa
Odabir metode ispitivanja uključuje mnoge čimbenike, uključujući kliničku postavku, kontrolu kvalitete testiranja, vrijeme preokreta, troškove ispitivanja, metode prikupljanja uzorkovanja, tehničke zahtjeve laboratorijskog osoblja, zahtjeve za objekte i opremu. Otkrivanje nukleinskih kiselina ili virusnih antigena jest pružiti izravne dokaze o prisutnosti virusa i potvrditi dijagnozu nove koronavirusne infekcije. Iako postoje mnoge metode za otkrivanje antigena, njihova osjetljivost na otkrivanje novog koronavirusa teoretski je niža od one u pojačanju RT-PCR. Ispitivanje antitijela je otkrivanje antivirusnih antitijela proizvedenih u ljudskom tijelu, što zaostaje u vremenu i često se ne može koristiti za rano otkrivanje tijekom akutne faze infekcije virusom. Klinička postavka aplikacija za otkrivanje može varirati, a mjesta prikupljanja uzoraka također mogu biti različita. Za otkrivanje virusnih nukleinskih kiselina i antigena, uzorak je potrebno prikupiti u respiratornom traktu gdje je prisutan virus, poput nazofaringealnih brisa, orofaringealnih brisa, ispljunčanog fluida ili bronhoalveolarnog lava (BALF). Za otkrivanje na bazi antitijela, uzorak krvi treba prikupiti i ispitati na prisutnost specifičnog antivirusnog antitijela (IgM/IgG). Međutim, rezultati ispitivanja antitijela i nukleinske kiseline mogu se međusobno nadopuniti. Na primjer, kada je rezultat ispitivanja negativan nukleinskom kiselinom, negativan IgM, ali IgG-pozitivan, ovi rezultati pokazuju da pacijent trenutno ne nosi virus, ali je oporavljen od nove infekcije koronavirusom. [2]
Prednosti i nedostaci novih testova koronavirusa
U protokolu za dijagnozu i liječenje nove koronavirus pneumonije (pokusna verzija7) (objavljena od strane Nacionalne komisije za zdravstvo i državna administracija tradicionalne kineske medicine 3. ožujka 2020.), ispitivanje nukleinske kiseline koristi se kao zlatna standardna metoda za dijagnozu romana Koronavirusna infekcija, iako se ispitivanje antitijela također smatra jednom od metoda potvrde za dijagnozu.
Patogeni i serološki nalazi
(1) Patogeni nalazi: Nova koronavirusna nukleinska kiselina može se otkriti u nazofaringealnim brisama, ispljuvanim izlučenjima, donjim dišnim putevima, krvlju, izletu i drugim uzorcima pomoću RT-PCRD/ili NGS metoda. Točnije je ako se uzorci dobivaju iz donjeg respiratornog trakta (ekstrakcija proputa ili zračnog trakta). Uzorci trebaju biti predani na testiranje što je prije moguće nakon prikupljanja.
(2) serološki nalazi: IgM specifičan za virus NCP postaje otprilike 3-5 dana nakon početka; IgG doseže titraciju najmanje četverostrukog povećanja tijekom revalescencije u usporedbi s akutnom fazom.
Međutim, odabir metoda ispitivanja ovisi o geografskim mjestima, medicinskim propisima i kliničkim okruženjima. U SAD-u je NIH izdao Coronavirus bolest 2019. (CoidD-19) Smjernice za liječenje (Ažurirano mjesto: 21. travnja 21. travnja), a FDA je izdala politiku za dijagnostičke testove za bolest koronavirusa-2019 tijekom hitne pomoći u javnom zdravstvu (izdana 16. ožujka ožujka 16. ožujka ožujka. ), u kojima se serološko ispitivanje IgM/IgG antitijela odabrala samo kao probirni test.
Metoda otkrivanja nukleinske kiseline
RT_PCR je vrlo osjetljiv test nukleinske kiseline namijenjen otkrivanju je li nova koronavirus RNA prisutna u respiratornom ili drugom uzorku. Pozitivan rezultat PCR testa znači prisutnost nove koronavirusne RNA u uzorku kako bi se potvrdila infekcija Coid-19. Negativni rezultat PCR testa ne znači odsutnost infekcije virusom jer na njega može utjecati loša kvaliteta uzorka ili vremenska točka bolesti u oporavljenoj fazi, itd. Iako je RT-PCR vrlo osjetljiv test, ima nekoliko nedostataka. RT-PCR testovi mogu biti intenzivni i dugotrajni, presudno ovisni o visokoj kvaliteti uzorka. To može biti izazov jer količina virusne RNA ne samo da se izuzetno varira između različitih pacijenata, već može varirati i unutar istog pacijenta, ovisno o vremenskim točkama prikupljanja uzorka, kao i faza infekcije ili početka kliničkih simptoma. Otkrivanje novog koronavirusa zahtijeva visokokvalitetne uzorke koji sadrže dovoljnu količinu netaknute virusne RNA.
RT-PCR test može dati pogrešan negativan rezultat (lažno negativan) za neke bolesnike koji imaju infekciju Coid-19. Kao što znamo, glavna mjesta infekcije novog koronavirusa nalaze se na plućima i donjem respiratornom traktu, poput alveola i bronhija. Stoga je uzorak ispljuvaka iz dubokog kašlja ili bronhoalveolarne tekućine za ispiranje (BALF) smatrao da ima najveću osjetljivost na otkrivanje virusa. Međutim, u kliničkoj praksi uzorci se često prikupljaju iz gornjeg respiratornog trakta pomoću nazofaringealnih ili orofaringealnih brisa. Prikupljanje ovih uzoraka nije samo neugodno za pacijente, već i zahtijeva posebno obučeno osoblje. Da bi uzorkovanje bilo manje invazivno ili lakše, pacijentima se u nekim slučajevima može dati oralni bris i omogućiti im da uzmu uzorak iz bukalne sluznice ili jezika koji se zamišljaju. Bez dovoljno virusne RNA, RT-qPCR može vratiti lažno negativni rezultat testa. U provinciji Hubei u Kini, RT-PCR osjetljivost u početnom otkrivanju prijavljena je samo oko 30%-50%, s prosjekom od 40%. Visoka stopa lažno negativnih najvjerojatnije bila je uzrokovana nedovoljnim uzorkovanjem.
Osim toga, RT-PCR test zahtijeva visoko obučeno osoblje za izvođenje složenih koraka ekstrakcije RNA i postupka pojačanja PCR-a. Također zahtijeva višu razinu zaštite biološke sigurnosti, posebnog laboratorijskog objekta i PCR instrumenta u stvarnom vremenu. U Kini, RT-PCR test za otkrivanje Coid-19 mora se izvesti u laboratorijima biološke sigurnosti 2 (BSL-2), sa zaštitom osoblja koristeći praksu biološke sigurnosti 3 (BSL-3). Prema ovim zahtjevima, od početka siječnja do početka veljače 2020., kapacitet CDC laboratorija Kine Wuhana mogao je otkriti samo nekoliko stotina slučajeva dnevno. Obično to ne bi bio problem pri testiranju drugih zaraznih bolesti. Međutim, kada se bavi globalnom pandemijom, kao što je Coidd-19, s potencijalno da se testiraju milijuni ljudi, RT-PCR postaje kritično pitanje zbog svojih zahtjeva za posebnim laboratorijskim objektima ili tehničkom opremom. Ovi nedostaci mogu ograničiti RT-PCR da se koristi kao učinkovit alat za probir, a također mogu dovesti do kašnjenja u izvještajima o rezultatima ispitivanja.
Metoda otkrivanja seroloških antitijela
S napretkom tečaja bolesti, posebno u srednjoj i kasnoj fazi, stopa otkrivanja antitijela je vrlo visoka. Studija u bolnici Wuhan Central South pokazala je da stopa otkrivanja antitijela može dostići više od 90% u trećem tjednu infekcije Covid-19. Također, antitijelo je proizvod ljudskog imunološkog odgovora protiv romana koronavirusa. Test antitijela nudi nekoliko prednosti u odnosu na RT-PCR. Prvo, serološka antitijela testira jednostavno i brzo. Testovi bočnog protoka antitijela mogu se koristiti za točku skrbi kako bi se postigao rezultat za 15 minuta. Drugo, cilj se serološkim testom otkriveno je antitijelo, za koje se zna da je mnogo stabilniji od virusne RNA. Tijekom prikupljanja, transporta, skladištenja i ispitivanja, uzorci za testove antitijela općenito su stabilniji od uzoraka za RT-PCR. Treće, budući da je antitijelo ravnomjerno raspoređeno u cirkulaciji krvi, postoji manja varijacija uzorkovanja u usporedbi s testom nukleinske kiseline. Volumen uzorka potreban za test antitijela je relativno mali. Na primjer, 10 mikrolitra krvi od prsta dovoljan je za upotrebu u testu bočnog protoka antitijela.
Općenito, test antitijela odabran je kao dodatak alat za otkrivanje nukleinske kiseline kako bi se poboljšala brzina otkrivanja novog koronavirusa tijekom tečajeva bolesti. Kada se test antitijela koristi zajedno s testom nukleinske kiseline, to može povećati točnost ispitivanja za dijagnozu koida19 smanjenjem potencijalnih lažno pozitivnih i lažno negativnih rezultata. Trenutačni vodič za rad ne preporučuje zasebno korištenje dvije vrste ispitivanja kao neovisni format otkrivanja, ali treba ga koristiti kao kombinirani format. [2]
Slika2:Ispravna interpretacija rezultata ispitivanja nukleinske kiseline i antitijela za otkrivanje nove infekcije koronavirusom
Slika 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Novi Coronavirus IgM/IgG antitijelo Dvostruki testni komplet (StrongStep®SARS-COV-2 IgM/IgG antitijelo brzog testa, imunokromatografija lateksa)
Slika 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-StrongStep®Novi koronavirus (SARS-COV-2) multipleks PCR komplet u stvarnom vremenu (otkrivanje za tri gena, metoda fluorescentne sonde).
Bilješka:Ovaj vrlo osjetljiv PCR komplet spreman za upotrebu dostupan je u liofiliziranom formatu (postupak sušenjanja zamrzavanja) za dugoročno skladištenje. Komplet se može prevoziti i pohraniti na sobnoj temperaturi i stabilan je godinu dana. Svaka cijev premixa sadrži sve reagense potrebne za pojačavanje PCR-a, uključujući reverznu transkripciju, taq polimerazu, prajmere, sonde i dntps supstrate. Korisnici mogu jednostavno rekonstituirati mješavinu dodavanjem vode s razredom PCR-a zajedno s predloškom, a zatim učitavanje na PCR instrument za pokretanje pojačanja.
Kao odgovor na novi izbijanje koronavirusa, Limaning Bio-Products Co., Ltd., brzo je radio na razvoju dva dijagnostička kompleta kako bi klinički i javno zdravstvo omogućili brzo dijagnosticiranje infekcije Coid-19. Ovi su setovi vrlo prikladni za upotrebu za probir velikih razmjera u zemljama i regijama u kojima se nova epidemija koronavirusa brzo širi, te za pružanje dijagnoze i potvrde za infekciju Coid-19. Ovi kompleti se koriste samo pod prethodno nesumnjivim odobrenjem za hitnu upotrebu (PEUA). Ispitivanje je ograničeno na laboratorije ovjerene u skladu s propisima nacionalnih ili lokalnih vlasti.
Metoda otkrivanja antigena
1. Otkrivanje virusnog antigena klasificirano je u istoj kategoriji izravnog otkrivanja kao i otkrivanje nukleinske kiseline. Ove metode izravne otkrivanja traže dokaze o virusnim patogenima u uzorku i mogu se koristiti za dijagnozu potvrde. Međutim, za razvoj setova za otkrivanje antigena zahtijeva visoku kvalitetu monoklonskih antitijela s jakim afinitetom i visokom osjetljivošću sposobnim prepoznati i hvatanje patogenih virusa. Obično je potrebno više od šest mjeseci za odabir i optimizaciju monoklonskog antitijela pogodnog za uporabu u pripremi kompleta za otkrivanje antigena.
2. Trenutno su reagensi za izravno otkrivanje novog koronavirusa još uvijek u fazi istraživanja i razvoja. Stoga nije klinički potvrđen i komercijalno dostupan nijedan komplet za otkrivanje antigena. Iako je ranije objavljeno da je dijagnostička tvrtka u Shenzhenu razvila komplet za otkrivanje antigena i klinički testirana u Španjolskoj, pouzdanost i točnost ispitivanja nisu se mogli potvrditi zbog prisutnosti problema s kvalitetom reagensa. Do danas, NMPA (bivši Kina FDA) još nije odobrio nijedan komplet za otkrivanje antigena za kliničku upotrebu. Zaključno, razvijene su različite metode otkrivanja. Svaka metoda ima svoje prednosti i ograničenja. Rezultati različitih metoda mogu se koristiti za provjeru i nadopunu.
3. Proizvodnja kvalitetnog testnog kompleta Coidd-19 snažno ovisi o optimizaciji tijekom istraživanja i razvoja. Liming Bio-Product Co., Ltd. Potrebni su testni setovi kako bi se ispunili strogi standardi proizvodnje i kontrole kvalitete kako bi se osiguralo da pružaju najvišu razinu performansi i dosljednosti. Znanstvenici u Liming Bio-Product Co., Ltd., imaju više od dvadeset godina iskustva u dizajniranju, testiranju i optimizaciji in vitro dijagnostičkih kompleta kako bi se osigurala najviša razina performansi u analitičkoj kvantifikaciji.
Tijekom pandemije Coid-19, kineska se vlada suočila s porastom velike potražnje za materijalima za prevenciju epidemije u međunarodnim žarištima. 5. travnja, na konferenciji za novinare, mehanizma za prevenciju i kontrolu državnog vijeća "Jačanje upravljanja kvalitetom medicinskih materijala i reguliranje reda tržišta", Jiang Fan, inspektor prve razine Ministarstva vanjske trgovine Ministarstva trgovine, rekao je: "Dalje, usredotočit ćemo svoje napore na dva aspekta, prvo, kako bismo ubrzali podršku više medicinskih materijala potrebnih međunarodnoj zajednici, a također, kako bismo poboljšali kontrolu kvalitete, regulaciju i upravljanje proizvodima. Dat ćemo kineski doprinos zajedničkom odgovoru na globalnu epidemiju i izgradnju zajednice sa zajedničkom budućnošću za čovječanstvo.
Slika 5:Liming Bio-Products Co., Ltd., novi Coronavirus Reagent dobio je potvrdu o registraciji EU CE
Počasna potvrda
Houshenshan
Slika 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. Podržao je planinsku bolnicu Wuhan Vulcan (Houshenshan) kako bi se borio protiv epidemije Coidd-19 i dobio je počasnu potvrdu Wuhan Crvenog križa. Planinska bolnica Wuhan Vulcan najpoznatija je bolnica u Kini koja se specijalizirala za liječenje teških kovida - 19 bolesnika.
Kako se nova izbijanja koronavirusa i dalje širi svijetom, Nanjing Limaning Bio-Products Co., Ltd., pojačava se kako bi podržao i pomogao zajednicama širom svijeta u našim inovativnim tehnologijama za borbu protiv ove neviđene globalne prijetnje. Brzo testiranje infekcije Coid-19 kritičan je dio rješavanja ove prijetnje. Nastavljamo doprinositi na značajan način pružanjem visokokvalitetnih dijagnostičkih platformi u ruke zdravstvenih radnika u prvoj liniji kako bi ljudi mogli dobiti kritične rezultate testiranja koji su im potrebni. Liming Bio-Products Co., napori Ltd. u borbi protiv pandemije Covid-19 su da doprinesu našim tehnologijama, iskustvima i stručnosti međunarodnim zajednicama za izgradnju globalne zajednice sudbine.
Dugi pritisak ~ skenirajte i slijedite nas
E -pošta: sales@limingbio.com
Web stranica: https://limingbio.com
Vrijeme objave: svibanj-01-2020
