Novi koronavirus (SARS-COV-2) multipleks PCR komplet u stvarnom vremenu
Ovaj vrlo osjetljiv PCR komplet spreman za upotrebu dostupan je u liofiliziranom formatu (postupak sušenjanja zamrzavanja) za dugoročno skladištenje. Komplet se može prevoziti i pohraniti na sobnoj temperaturi i stabilan je godinu dana. Svaka cijev premixa sadrži sve reagense potrebne za PCR pojačanje, uključujući reverznu transkripciju, taq polimerazu, primere, sonde i dntps supstrate. Potrebno je samo dodati 13UL destiliranu vodu i 5UL ekstrahiranog RNA predloška, a zatim se može pokrenuti i pojačati na PCR instrumentima.
QPCR stroj trebao bi ispuniti sljedeće zahtjeve:
1. FIT 8 Strip PCR cijev Volumen 0,2 ml
2. Imati više od četiri kanala za otkrivanje:
| Kanal | Uzbuđenje (nm) | Emisija (NM) | Unaprijed kalibrirane boje |
| 1. | 470 | 525 | Fam, Sybr Green I |
| 2 | 523 | 564 | Vic, Hex, Tet, Joe |
| 3. | 571 | 621 | Rox, Texas-Red |
| 4 | 630 | 670 | Cy5 |
PCR-platforme:
7500realno-vremenski PCR sustav, Biorad CF96, Icycler IQ ™ PCR sustav za otkrivanje u stvarnom vremenu, Stratagene MX3000P, MX3005P
Poteškoća u transportu novog koronavirusnog koronavirusnog koronavirusa reagensa
Kada se konvencionalni reagensi za otkrivanje nukleinske kiseline transportiraju na velike udaljenosti, potrebno je (-20 ± 5) ℃ skladištenja i transporta hladnog lanca kako bi se osiguralo da bioaktivni enzim u reagensima ostane aktivan. Da bi se osigurala da temperatura dosegne standard, potrebno je nekoliko kilograma suhog leda za svaku kutiju reagensa za ispitivanje nukleinske kiseline čak i manje od 50 g, ali može trajati samo dva ili tri dana. O perspektivi industrijske prakse, stvarna težina reagensa koje su izdali proizvođači manja je od 10% (ili daleko manja od ove vrijednosti) kontejnera. Većina težine dolazi od suhog leda, pakiranja leda i kutija od pjene, tako da su troškovi transporta izuzetno visoki.
U ožujku 2020. Covid-19 se počeo izbiti u velikom opsegu u inozemstvu, a potražnja za novim reagensom za otkrivanje nukleinske kiseline koronavirusnih kiselina dramatično se povećala. Unatoč visokim troškovima izvoza reagensa u hladnom lancu, većina proizvođača i dalje ga može prihvatiti zbog velike količine i velike dobiti.
Međutim, s poboljšanjem nacionalnih izvoznih politika za anti-pandemijske proizvode, kao i nadogradnjom nacionalne kontrole nad protokom ljudi i logistike, postoji proširenje i nesigurnost u vremenu transporta reagensa, što je rezultiralo uzrokovanim istaknutim problemima s proizvodima po prijevozu. Produljeno vrijeme prijevoza (vrijeme prijevoza od oko pola mjeseca je vrlo uobičajeno) dovodi do čestih kvarova proizvoda kada proizvod dosegne klijenta. To je uznemirilo većinu izvoznih poduzeća nukleinskih kiselina.
Liofilizirana tehnologija za PCR reagens pomogla je prevozu novog reagensa za otkrivanje nukleinske kiseline koronavirusa širom svijeta
Liofilizirani PCR reagensi mogu se transportirati i pohraniti na sobnoj temperaturi, što ne samo da može smanjiti troškove prijevoza, već također izbjegavati probleme kvalitete uzrokovane procesom transporta. Stoga je liofiliziranje reagensa najbolji način za rješavanje problema izvoznog prijevoza.
Liofilizacija uključuje zamrzavanje otopine u čvrsto stanje, a zatim sublimatima i odvajanje vodene pare u stanju vakuuma. Osušena rastvora ostaje u spremniku s istim sastavom i aktivnošću. U usporedbi s konvencionalnim tekućim reagensima, cjelovita komponentna liofilizirana nova koronavirusna detekcija nukleinske kiseline proizvedena od strane Limaning Bio ima sljedeće karakteristike:
Izuzetno jaka toplinska stabilnost:Može s tretmanom stalka na 56 ℃ 60 dana, a morfologija i performanse reagensa ostaju nepromijenjeni.
Normalna skladištenja i transporta temperature:Nema potrebe za hladnim lancem, nema potrebe za skladištima na niskoj temperaturi prije nego što se otkrije, u potpunosti otpustite prostor za skladištenje hladnog.
Gotov za upotrebu:Lijofilizaciju svih komponenti, nema potrebe za konfiguracijom sustava, izbjegavajući gubitak komponenti s visokom viskoznošću poput enzima.
Multipleks ciljevi u jednoj cijevi:Cilj otkrivanja pokriva novi gen koronavirusa orf1ab, n gen, s gen za izbjegavanje genovarijacije virusa. Da bi se smanjila lažno negativna, ljudska RNase P gen koristi se kao unutarnja kontrola kako bi se zadovoljile kliničke potrebe za kontrolom kvalitete uzorka.
