Multipleksni komplet za PCR u stvarnom vremenu za novi koronavirus (SARS-CoV-2).
Ovaj vrlo osjetljiv, spreman za korištenje PCR komplet dostupan je u liofiliziranom formatu (postupak sušenja zamrzavanjem) za dugotrajno skladištenje.Komplet se može transportirati i čuvati na sobnoj temperaturi i stabilan je godinu dana.Svaka epruveta premiksa sadrži sve reagense potrebne za PCR amplifikaciju, uključujući reverznu transkriptazu, Taq polimerazu, primere, sonde i dNTPs supstrate.Potrebno je samo dodati 13ul destilirane vode i 5ul ekstrahirane RNA šablone, a zatim se može pokrenuti i pojačati na PCR instrumentima.
qPCR stroj treba ispunjavati sljedeće zahtjeve:
1. Stavite 8 traka PCR epruvete volumena 0,2 ml
2. Imati više od četiri kanala za detekciju:
| Kanal | uzbuđenje (nm) | Emisija (nm) | Prethodno kalibrirane boje |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Zeleni I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-CRVENO |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR platforme:
7500 PCR sustav u stvarnom vremenu, Biorad CF96, iCycler iQ™ PCR sustav detekcije u stvarnom vremenu, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Poteškoća transporta hladnog lanca reagensa za detekciju nukleinske kiseline novog koronavirusa
Kada se konvencionalni reagensi za detekciju nukleinske kiseline prevoze na velike udaljenosti, potrebno je skladištenje i transport hladnog lanca (-20±5) ℃ kako bi se osiguralo da bioaktivnost enzima u reagensima ostane aktivna.Kako bi se osiguralo da temperatura dosegne standard, potrebno je nekoliko kilograma suhog leda za svaku kutiju reagensa za testiranje nukleinske kiseline čak i manje od 50 g, ali može trajati samo dva ili tri dana.Iz perspektive industrijske prakse, stvarna težina reagensa koje izdaju proizvođači je manja od 10% (ili daleko manja od ove vrijednosti) spremnika.Najveći dio težine dolazi od suhog leda, paketa leda i pjenastih kutija, pa su troškovi transporta iznimno visoki.
U ožujku 2020. COVID-19 je počeo izbijati u velikim razmjerima u inozemstvu, a potražnja za reagensom za otkrivanje nukleinske kiseline novog koronavirusa dramatično se povećala.Unatoč visokim troškovima izvoza reagensa u hladnom lancu, većina proizvođača ga ipak može prihvatiti zbog velike količine i visoke dobiti.
Međutim, s poboljšanjem nacionalnih izvoznih politika za proizvode protiv pandemije, kao i unapređenjem nacionalne kontrole nad protokom ljudi i logistike, dolazi do produženja i nesigurnosti u vremenu transporta reagensa, što je rezultiralo izraženim problemima s proizvodima uzrokovanim prijevozom.Produljeno vrijeme transporta (vrijeme transporta od oko pola mjeseca je vrlo uobičajeno) dovodi do čestih kvarova proizvoda kada proizvod stigne do klijenta.To je uznemirilo većinu poduzeća za izvoz reagensa nukleinskih kiselina.
Liofilizirana tehnologija za PCR reagens pomogla je u transportu reagensa za otkrivanje nukleinske kiseline novog koronavirusa diljem svijeta
Liofilizirani PCR reagensi mogu se transportirati i čuvati na sobnoj temperaturi, što ne samo da može smanjiti troškove transporta, već i izbjeći probleme kvalitete uzrokovane procesom transporta.Stoga je liofilizacija reagensa najbolji način rješavanja problema izvoznog transporta.
Liofilizacija uključuje zamrzavanje otopine u čvrsto stanje, a zatim sublimiranje i odvajanje vodene pare u vakuumu.Osušena otopljena tvar ostaje u posudi istog sastava i aktivnosti.U usporedbi s konvencionalnim tekućim reagensima, punokomponentni liofilizirani reagens za otkrivanje nukleinske kiseline Novel Coronavirusa koji proizvodi Liming Bio ima sljedeće karakteristike:
Izuzetno jaka toplinska stabilnost:može stajati na 56 ℃ tijekom 60 dana, a morfologija i učinak reagensa ostaju nepromijenjeni.
Čuvanje i transport na normalnim temperaturama:nema potrebe za hladnim lancem, nema potrebe za pohranjivanjem na niskoj temperaturi prije otvaranja, potpuno oslobodite prostor za hladno skladištenje.
Spremno za uporabu:liofiliziranje svih komponenti, nema potrebe za konfiguracijom sustava, izbjegavajući gubitak komponenti visokog viskoziteta kao što je enzim.
Multipleksne mete u jednoj cijevi:cilj otkrivanja pokriva novi gen ORF1ab koronavirusa, gen N, S gen kako bi se izbjegla genovarijacija virusa.Kako bi se smanjio lažno negativan, humani RNase P gen se koristi kao interna kontrola, kako bi se zadovoljila klinička potreba za kontrolom kvalitete uzorka.
